Wo liegen die größten Schwierigkeiten?

[Lisa]

diese MTA!!!! Die weiß alles und kann alles

Mensch, schätz dich glücklich! Das ist eigentlich die Grundvoraussetzung für eine vernünftige Methodik, die nicht 25mal überarbeitet werden muss, weil man das Rad überflüssigerweise zum zweiten Mal erfindet.

Ich arbeite auch mit CellQuest auf Mac (ich hasse Mac!!).
Gibt 'n brauchbares Handbuch zu CellQuest.
Hab viele Messungen mit 2 Fluoreszensfarbstoffen (FITC und PE) gemacht. Das ist gar kein Problem. Du brauchst nur die Isotypkontrollen, d.h. IgG's vom selben Subtyp wie deine farbstoffgekoppelten Antikörper, nach denen du deine Instrument-Settings so einstellst, dass die Messwerte alle im unteren Quadranten der ersten Zehnerpotenz liegen. Das entspricht dann der Autofluoreszenz.

Und zum Thema Thrombos: Vorsicht! Die sind sauempfindlich. Die brauchen das super-sanft-und-streichel-Programm und zwar nicht nur, was den Puffer anbelangt.

[Lava]

Jepp. Nicht zu soll schütteln, sonst aktivieren sie sich von alleine, die Schlawiner.

Zum Thema MTA: leider geht sie ab Januar nach Australien. Wir bekommen eine(n) neue(n), aber der/die ist bestimmt niemals so gut wie die jetzige... höchstens netter

[Dr. Sziget]

Moin,
ich stehe auch kurz davor die Doktorarbeit zu beginnen, zentrales Element wird das Facsen sein. Kann mir jemand nen kurzen Abriss geben wie ich das am besten angehe oder wo die fiesesten Fussangeln sind, die ihr kennt.
Wäre toll.

Grüße
Dr.Sziget

[Die Niere]

Die fiesesten Fussangel liegen wohl nicht im Facsen selbst, sondern vielmehr in den Versuchen, dessen Ergebnis Du ja beszimmen möchtest - um was genau handelt es sich denn?

Ansonsten ist immer die zu kleine Anzahl gewachsener Zellen eine Fussangel, die einem den Spass am FACSen nehmen kann - und die Lautstärke...aber dagegen hab ich immer Red Hot Chilli Peppers ganz aufgedreht...

gruesse, die niere

[Lava]

Lautstärke? Unser Gerät gibt keinen Ton von sich

Also für mich ist nach wie vor die Probenvorbereitung das größte Problem. Für schöne Kurven braucht man schöne Zellen (oder weas auch immer). Und dann muss man die richtigen Konzentrationen für das finden, was man messen will. Da pipettiert man dann teilweise im Mikroliter-Bereich. Und wenn ich dann auch noch irgendwas vorverdünnen muss, oje

Na ja, lass es dir zeigen, pass gut auf, schreib viel mit und schau dir mal ein bisschen Theorie zum Prinzip der Durchflusszytometrie an.